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氨基酸液質(zhì) 液體氨基酸原材料

檢驗氨基酸用什么方法?

1.茚三酮反應,氨基酸與其發(fā)生反應縮合成藍色物質(zhì)。除開脯氨酸和羥脯氨酸,他們與其反應生成黃色衍生物。

2.桑格反應,氨基酸與其反應會生成黃色的2,4-二硝基氨基酸,可以用于鑒定多肽或蛋白質(zhì)的N端氨基酸。

3.艾德曼反應(DNFB反應),即氨基酸與苯異硫氰酸反應生成相應的苯氨基硫甲酰氨基酸。

氨基酸檢測?

你若是問蛋白質(zhì),我可以直接告訴你又雙縮脲試劑(中學階段),但氨基酸的檢驗比蛋白質(zhì)麻煩多了.一、氨基酸的分離和檢測氨基酸的分離和檢測手段,以往用化學分析法、層析法、比色法、氣相色譜法、氨基酸自動分析儀.隨著高效液相色譜及填料的發(fā)展,HPLC在氨基酸檢測方面顯示了其特有的優(yōu)越性.但大多數(shù)氨基酸無紫外吸收和熒光發(fā)射特性,為提高分析檢測靈敏度和分離選擇特性,通常將氨基酸衍生,衍生方式有柱前衍生法與柱后衍生法.HPLC與各種衍生相結(jié)合的氨基酸分析技術,構(gòu)成了具有廣泛適用性的現(xiàn)代氨基酸分析技術.x0d二、鑒定是哪種氨基酸,不同的氨基酸要用不同的方法.1、茚三酮反應 (ninhydrin reaction) 茚三酮(弱酸環(huán)境加熱) 紫色(脯氨酸、羥脯氨酸為黃色) (檢驗α-氨基)x0d2、坂口反應 (Sakaguchi reaction) 丙氨酸x0dα-萘酚+堿性次溴酸鈉 紅色 (檢驗胍基 精氨酸有此反應)x0d3、米隆反應(又稱米倫氏反應) HgNO3+HNO3+熱 紅色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應,未加熱則為白色)x0d4、Folin-Ciocalteau反應(酚試劑反應) 磷鎢酸-磷鉗酸 藍色 (檢驗酚基 酪氨酸有此反應)x0d5、黃蛋白反應 濃硝酸煮沸 黃色 (檢驗苯環(huán) 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反應)x0d6、Hopkin-Cole反應(乙醛酸反應) 加入乙醛酸混合后徐徐加入濃硫酸 乙醛與濃硫酸接觸面處產(chǎn)生紫紅色環(huán) (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應)x0d7、Ehrlich反應 P-二甲氨基苯甲醛+濃鹽酸 藍色 (檢驗吲哚基 色氨酸有此反應)x0d8、硝普鹽試驗 Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 紅色 (檢驗巰基 半胱氨酸有此反應)

測定氨基酸標準品,查文獻發(fā)現(xiàn)基本上都是用0.1M鹽酸溶解進液質(zhì)檢測,為什么用0.1M鹽酸?

想要滴定,一般需要準確的酸濃度,這需要強電解質(zhì)的酸,這一點,對應二元的硫酸來說就不太適合。(可以查,硫酸的第二個H離子的電離平衡常數(shù),非完全電離,只是電離率較高);

而常見的酸也就是鹽酸、硫酸、硝酸。鹽酸的不具有氧化性,可以減少副反應。所以選鹽酸。

此外,滴定的時候,要用稀溶液,才能減小滴定過程中的誤差。

氨基酸液質(zhì)分析 274是什么物質(zhì)

液質(zhì)流動相選甲醇和水體系是因為對于液相色譜而言,物質(zhì)的分離是基于被測物在流動相和固定相間的分配比不同而獲得的,不管是不是中性物質(zhì),只要它們在兩相間的分配比不同就可以分離。而流動相的改變也不過是為了獲取這個分配比的差異而已。

液質(zhì)流動相的選擇方法:

1、流動性主要看結(jié)構(gòu),極性大小,溶解性,對酸堿的敏感性等等。 大體上有機相是乙腈,甲醇,水相是甲酸水,乙酸水,甲醇水或者加點乙酸銨等。

2、再看化合物質(zhì)譜條件是(+),則水相可加甲酸,乙酸,一般0.1%,也可以0.2%,可以是條件,原則是能濃度低就不要濃度高,(-),不要用酸,會有抑制。

3、液相分離效果,可以用不同的有機相:水相比例,是分離效果好就可以。

4、觀察uv最佳吸收是多少?若離200nm很近,建議有機相用乙腈。

5、重要的是,水相不加任何物質(zhì)就可楚風很好,建議不要加其他的。

6、液質(zhì)聯(lián)用所用的流動相,不能用不揮發(fā)性的物質(zhì),如:磷酸鹽緩沖液等,常用甲酸鹽,乙酸鹽等易揮發(fā)的物質(zhì)用作緩沖鹽的首選。 在做液質(zhì)聯(lián)用測定生物樣品時,若選擇M H峰可在流動相中加入一些添加劑提供H離子,如甲酸等,一般準分子離子峰較穩(wěn)定。

7、液質(zhì)聯(lián)用的流動相要求使用揮發(fā)性的酸堿鹽,常用的如下: 酸—甲酸、乙酸(<2.0%),三氟醋酸(≤0.5%) 堿—甲胺、乙胺、三乙胺(<1.0%) 鹽—醋酸銨(10-5mmol/L)。

質(zhì)譜法測定氨基酸的原理?詳細步驟,不勝感激!?。?!

用液質(zhì)聯(lián)用儀做可以得到氨基酸的M+H峰,可以得到氨基酸的確認

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