氨基酸的檢驗結(jié)果為什么有很大差別

復(fù)方氨基酸注射液的生產(chǎn)，主要存在二個問題，

一是澄明度，影響澄明度的關(guān)鍵是原料純度，一般均需反復(fù)精制。

其次是穩(wěn)定性，主要表現(xiàn)為含量下降色澤變深，其中以變色最為明顯。

影響穩(wěn)定性的因素有 氧氣、光、溫度、金屬離子、pH等，故輸液要通氮氣，調(diào)節(jié)pH，加入抗氧劑等措施，并避免金屬離子混入，避光保存。

一個配制批次，滅菌后的同一柜次，三個地方測出三種含量，主要成份是色氨酸最明顯也就是說含量不均，上下差10幾個標(biāo)示量，偏高的現(xiàn)象還是多。

就色氨酸含量不均說一下我的看法：

1.活性炭的加入量必須精確。

2.加入活性炭后的攪拌時間必須保證30分鐘以上,保證有足夠的吸咐時間。

3.經(jīng)常檢查配制罐的充入氮氣狀態(tài)，有些氨基酸成份遇氧氣分解氧化。

有些是秘密了不便全說，我想上述保證了問題就解決了

如何處理葡萄酒中氨基酸的檢測結(jié)果

氨基酸檢測最早是用氨基酸分析儀，不過早過時了，現(xiàn)在用HPLC的比較多，采用HPLC柱后衍生的方法，不過弊端太多，做初步的檢測還可以，但做科研課題就不行了。最好的方法是用質(zhì)譜技術(shù)。多達(dá)42種氨基酸的含量測定，采用質(zhì)譜技術(shù)并使用44種氨基酸同位素對內(nèi)標(biāo)，精確度和重復(fù)性都有很好的保證，和傳統(tǒng)的毛細(xì)管電泳法、HPLC法、氨基酸分析儀比較，無論是從精度上、還是檢測的范圍上和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度上都有了很大的提高和改善。

紙層析法分析氨基酸結(jié)果

氨基酸的分離鑒定——紙層析法

一,實驗?zāi)康?/p>

掌握氨基酸紙層析的方法和原理,學(xué)會分析待

測樣品的氨基酸成分.

二,實驗原理

紙層析是以濾紙為惰性支持物的分配層析.濾紙纖維上的羥基具有親水性,吸附一層水作為固定相,有機溶劑為流動相.當(dāng)有機相流經(jīng)固定相時,物質(zhì)在兩相間不斷分配而得到分離.

溶質(zhì)在濾紙上的移動速度用Rf值表示:

Rf=原點到層析斑點中心的距離/原點到溶劑前沿的距離

在一定的條件下某種物質(zhì)的Rf值是常數(shù).Rf值的大小與物質(zhì)的結(jié)構(gòu),性質(zhì),溶劑系統(tǒng),層析濾紙的質(zhì)量和層析溫度等因素有關(guān).本實驗利用紙層析法分離氨基酸.

三,實驗器材

(1)大燒杯(5000mL):1只/組

(2)微量注射器(100

L):1只/

組.

(3)噴霧器:公用.

(4)培養(yǎng)皿:1只/組.

(5)層析濾紙(長22cm,寬14cm的新華一號濾紙):1張/組.

(6)直尺,鉛筆:自備.

(7)電吹風(fēng):1只/組.

(8)托盤,針,白線:1套/組.

(9)手套:1雙/組.

(10)塑料薄膜:公用.

(11)小燒杯:50mL,1只/組.

四,實驗試劑

(1)擴展劑:將4體積正丁醇和1體積冰醋酸放入分液漏斗中,與5體積水混合,充分振蕩,靜置后分層,棄去下層水層.

(2)氨基酸溶液:0.5%的已知氨基酸溶液3種(賴氨酸,苯丙氨酸,纈氨酸),0.5%的待測氨基酸液1種.

(3)顯色劑:0.1%水合茚三酮正丁醇溶液.

實驗試劑

五,實驗操作

檢查培養(yǎng)皿是否干燥,潔凈;若否,將其洗凈并置于干燥箱內(nèi)120℃烘干.

(1)平衡:剪一大塊塑料薄膜鋪在桌面上,將層析缸或大燒杯到置于塑料薄膜上,再把盛有約20mL展層溶液的小燒杯置于倒置的層析缸或大燒杯中,用塑料薄膜密封起來,平衡20min.

(2)規(guī)劃:帶上手套,取寬約14cm,高約22cm的層析濾紙一張.在紙的下端距邊緣2cm處輕輕用鉛筆劃一條平行于底邊的直線A,在直線上做4個記號,記號之間間隔2cm,這就是原點的位置.另在距左邊緣1cm處畫一條平行于左邊緣的直線B,在B線上以A,B兩線的交點為原點標(biāo)明刻度(以厘米為單位),參見左圖.

(3)點樣:用微量注射器分別取10mL左右的氨基酸樣品(每取一個樣之前都要用蒸餾水洗滌微量注射器,以免交叉污染),點在這四個位置上.擠一滴點一次,同一位置上需點2～3次,2～3mL/次,每點完一點,立刻用電吹風(fēng)熱風(fēng)吹干后再點,以保證每點在紙上擴散的直徑最大不超過3mm.每人須點4個樣,其中3個是已知樣,1個是待測樣品.

(4)層析:用針,線將濾紙縫成筒狀,紙的兩側(cè)

邊緣不能接觸且要保持平行,參見圖3-3.向培養(yǎng)皿中加入擴展劑,使其液面高度達(dá)到1cm左右,將點好樣的濾紙筒直立于培養(yǎng)皿中(點樣的一端在下,擴展劑的液面在A線下約1cm),罩上大燒杯,仍用塑料薄膜密封.當(dāng)擴展劑上升到A線時開始計時,每隔一定時間測定一下擴展劑上升的高度,填入表3-1中.當(dāng)上升到15～18cm,取出濾紙,剪斷連線,立即用鉛筆描出溶劑前沿線,迅速用電吹風(fēng)熱風(fēng)吹干.

(5)顯色:用噴霧器在通風(fēng)廚中向濾紙上均勻噴上0.1%茚三酮正丁醇溶液,然后立即用熱風(fēng)吹干,即可顯出各層析斑點,參見左圖.

(6)計算各種氨基酸的Rf值,并判斷混合樣品中都有哪些氨基酸,各人將自己的實驗結(jié)果貼在實驗報告上,見表3-2.

(7)以層析時間為橫坐標(biāo),擴展劑上升高度為縱坐標(biāo)畫圖,求出擴展劑上升到18cm時所需要的時間.

(8)將微量注射器內(nèi)外用蒸餾水清洗干凈,倒掉用過的展層液和平衡液,將培養(yǎng)皿洗凈,整理好桌面上的儀器和試劑.

是否所有氨基酸黃色反應(yīng)都呈陽性結(jié)果？是否大部分蛋白質(zhì)呈陽性反映？為什么？

不是，黃色反應(yīng)是對R基團上有特定的基團的氨基酸才呈陽性結(jié)果 有這些氨基酸的蛋白質(zhì)呈陽性反映