許多不同的氨基酸混在一起,怎樣將它們分離或制備

一、沉淀法：1.利用氨基酸的溶解度分離或等電點沉淀

2.特殊試劑沉淀法

二、離子交換：離子交換是利用不溶性高分子化合物,就是離子交換樹脂對不同氨基酸吸附能力的差異對氨基酸混合物進行分組或?qū)崿F(xiàn)單一成分的分離.

三、萃取：1、反應(yīng)萃取：選取適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)萃取劑,其解離出來的離子與氨基酸解離出來的離子發(fā)生反應(yīng),生成可以溶于有機溶劑的萃取配合物,從而使氨基酸從水相進入有機相.

2、反相微膠團萃取：反相微膠團是溶在有機溶劑中的表面活性劑自發(fā)形成的納米級的聚體,表面活性劑的極性尾與外在非極性的有機溶劑接觸,而極性頭則排列在內(nèi)形成極性核,極性核溶于水后就形成了“水池”,當(dāng)含有氨基酸的水溶液與反相微膠團的有機溶劑相混合時,氨基酸以帶電離子狀態(tài)進入反相微膠團的水池內(nèi)而被分離

氨基酸分離的方法還有很多,但是常用的就是離子交換.

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從氨基酸混合物中分離鑒定氨基酸的方法有哪些

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這個考察的就是氨基酸的分離方法，教材上都有。如根據(jù)電性，質(zhì)量，大小等分離（電泳，離心，層析等方法）。書上寫得很詳細(xì)。

氨基酸需要什么原料?

氨基酸合成

氨基酸合成amino acid synthesis

組成蛋白質(zhì)的大部分氨基酸是以埃姆登-邁耶霍夫（Embden－Meyerhof）途徑與檸檬酸循環(huán)的中間物為碳鏈骨架生物合成的。例外的是芳香族氨基酸、組氨酸，前者的生物合成與磷酸戊糖的中間物赤蘚糖-4-磷酸有關(guān)，后者是由ATP與磷酸核糖焦磷酸合成的。微生物和植物能在體內(nèi)合成所有的氨基酸，動物有一部分氨基酸不能在體內(nèi)合成（必需氨基酸）。必需氨基酸一般由碳水化合物代謝的中間物，經(jīng)多步反應(yīng)（6步以上）而進行生物合成的，非必需氨基酸的合成所需的酶約14種，而必需氨基酸的合成則需要更多的，約有60種酶參與。生物合成的氨基酸除作為蛋白質(zhì)的合成原料外，還用于生物堿、木質(zhì)素等的合成。另一方面，氨基酸在生物體內(nèi)由于氨基轉(zhuǎn)移或氧化等生成酮酸而被分解，或由于脫羧轉(zhuǎn)變成胺后被分解。

氨基酸（amino acid）：是含有一個堿性氨基和一個酸性羧基的有機化合物，氨基一般連在α-碳上。氨基酸的結(jié)構(gòu)通式

是生物功能大分子蛋白質(zhì)的基本組成單位。

氨基酸的分類

必需氨基酸（essential amino acid）：指人（或其它脊椎動物）（賴氨酸，蘇氨酸等）自己不能合成，需要從食物中獲得的氨基酸。

非必需氨基酸（nonessential amino acid）：指人（或其它脊椎動物）自己能由簡單的前體合成，不需要從食物中獲得的氨基酸。

另有酸性、堿性、中性、雜環(huán)分類，是根據(jù)其化學(xué)性質(zhì)分類的。

檢測：

茚三酮反應(yīng)（ninhydrin reaction）：在加熱條件下，氨基酸或肽與茚三酮反應(yīng)生成紫色（與脯氨酸反應(yīng)生成黃色）化合物的反應(yīng)。

蛋白質(zhì)：

肽鍵（peptide bond）:一個氨基酸的羧基與另一個的氨基的氨基縮合，除去一分子水形成的酰氨鍵。

肽（peptide）:兩個或兩個以上氨基通過肽鍵共價連接形成的聚合物。

是氨基酸通過肽鍵相連的化合物，蛋白質(zhì)不完全水解的產(chǎn)物也是肽。肽按其組成的氨基酸數(shù)目為2個、3個和4個等不同而分別稱為二肽、三肽和四肽等，一般含10個以下氨基酸組成的稱寡肽（oligopeptide），由10個以上氨基酸組成的稱多肽（polypeptide），它們都簡稱為肽。肽鏈中的氨基酸已不是游離的氨基酸分子，因為其氨基和羧基在生成肽鍵中都被結(jié)合掉了，因此多肽和蛋白質(zhì)分子中的氨基酸均稱為氨基酸殘基（amino acid residue）。

多肽有開鏈肽和環(huán)狀肽。在人體內(nèi)主要是開鏈肽。開鏈肽具有一個游離的氨基末端和一個游離的羧基末端，分別保留有游離的α－氨基和α－羧基，故又稱為多肽鏈的N端（氨基端）和C端（羧基端），書寫時一般將N端寫在分子的左邊，并用（H）表示，并以此開始對多肽分子中的氨基酸殘基依次編號，而將肽鏈的C端寫在分子的右邊，并用（OH）來表示。目前已有約20萬種多肽和蛋白質(zhì)分子中的肽段的氨基酸組成和排列順序被測定了出來，其中不少是與醫(yī)學(xué)關(guān)系密切的多肽，分別具有重要的生理功能或藥理作用。

多肽在體內(nèi)具有廣泛的分布與重要的生理功能。其中谷胱甘肽在紅細(xì)胞中含量豐富，具有保護細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)及使細(xì)胞內(nèi)酶蛋白處于還原、活性狀態(tài)的功能。而在各種多肽中，谷胱甘肽的結(jié)構(gòu)比較特殊，分子中谷氨酸是以其γ－羧基與半胱氨酸的α－氨基脫水縮合生成肽鍵的，且它在細(xì)胞中可進行可逆的氧化還原反應(yīng)，因此有還原型與氧化型兩種谷胱甘肽。

近年來一些具有強大生物活性的多肽分子不斷地被發(fā)現(xiàn)與鑒定，它們大多具有重要的生理功能或藥理作用，又如一些“腦肽”與機體的學(xué)習(xí)記憶、睡眠、食欲和行為都有密切關(guān)系，這增加了人們對多肽重要性的認(rèn)識，多肽也已成為生物化學(xué)中引人矚目的研究領(lǐng)域之一。

多肽和蛋白質(zhì)的區(qū)別，一方面是多肽中氨基酸殘基數(shù)較蛋白質(zhì)少，一般少于50個，而蛋白質(zhì)大多由100個以上氨基酸殘基組成，但它們之間在數(shù)量上也沒有嚴(yán)格的分界線，除分子量外，現(xiàn)在還認(rèn)為多肽一般沒有嚴(yán)密并相對穩(wěn)定的空間結(jié)構(gòu)，即其空間結(jié)構(gòu)比較易變具有可塑性，而蛋白質(zhì)分子則具有相對嚴(yán)密、比較穩(wěn)定的空間結(jié)構(gòu)，這也是蛋白質(zhì)發(fā)揮生理功能的基礎(chǔ)，因此一般將胰島素劃歸為蛋白質(zhì)。但有些書上也還不嚴(yán)格地稱胰島素為多肽，因其分子量較小。但多肽和蛋白質(zhì)都是氨基酸的多聚縮合物，而多肽也是蛋白質(zhì)不完全水解的產(chǎn)物。

蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)（primary structure）：指蛋白質(zhì)中共價連接的氨基酸殘基的排列順序。

氨基酸是指一類含有羧基并在與羧基相連的碳原子下連有氨基的有機化合物。是構(gòu)成動物營養(yǎng)所需蛋白質(zhì)的基本物質(zhì)。

人體所需的氨基酸約有22種，分非必需氨基酸和必需氨基酸（須從食物中供給）。

必需氨基酸指人體不能合成或合成速度遠(yuǎn)不適應(yīng)機體的需要，必需由食物蛋白供給，這些氨基酸稱為必需氨基酸。共有10種其作用分別是：

（一） 賴氨酸：促進大腦發(fā)育，是肝及膽的組成成分，能促進脂肪代謝，調(diào)節(jié)松果腺、乳腺、黃體及卵巢，防止細(xì)胞退還；

（二） 色氨酸：促進胃液及胰液的產(chǎn)生；

（三） 苯丙氨酸：參與消除腎及膀胱功能的損耗；

（四） 蛋氨酸；參與組成血紅蛋白、組織與血清，有促進脾臟、胰臟及淋巴的功能；

（五） 蘇氨酸：有轉(zhuǎn)變某些氨基酸達(dá)到平衡的功能；

（六） 異亮氨酸：參與胸腺、脾臟及腦下腺的調(diào)節(jié)以及代謝；腦下腺屬總司令部作用于（1） 甲狀腺（2）性腺；

（七） 亮氨酸：作用平衡異亮氨酸；

（八） 纈氨酸：作用于黃體、乳腺及卵巢。

（九） 組氨酸：作用于代謝的調(diào)節(jié)；

（十）精氨酸：促進傷口愈合，精子蛋白成分。

其理化特性大致有：

1）都是無色結(jié)晶。熔點約在230。C以上，大多沒有確切的熔點，熔融時分解并放出CO2；都能溶于強酸和強堿溶液中，除胱氨酸、酪氨酸、二碘甲狀腺素外，均溶于水；除脯氨酸和羥脯氨酸外，均難溶于乙醇和乙醚。

2）有堿性[二元氨基一元羧酸，例如賴氨酸（lysine）]；酸性[一元氨基二元羧酸，例如谷氨酸（Glutamic acid）]；中性[一元氨基一元羧酸，例如丙氨酸（Alanine）]三種類型。大多數(shù)氨基酸都呈顯不同程度的酸性或堿性，呈顯中性的較少。所以既能與酸結(jié)合成鹽，也能與堿結(jié)合成鹽。

3)由于有不對稱的碳原子，呈旋光性。同時由于空間的排列位置不同，又有兩種構(gòu)型：D型和L型，組成蛋白質(zhì)的氨基酸，都屬L型。 由于以前氨基酸來源于蛋白質(zhì)水解（現(xiàn)在大多為人工合成），而蛋白質(zhì)水解所得的氨基酸均為α-氨基酸，所以在生化研究方面氨基酸通常指α-氨基酸。至于β、γ、δ……ω等的氨基酸在生化研究中用途較小，大都用于有機合成、石油化工、醫(yī)療等方面。氨基酸及其 衍生物品種很多，大多性質(zhì)穩(wěn)定，要避光、干燥貯存。

◇必需氨基酸（essential amino acids）

指人（或其它脊椎動物）自己不能合成，需要從飲食中獲得的氨基酸，例如賴氨酸、蘇氨酸等氨基酸。

◇非必需氨基酸（nonessential amino acids）

指人（或其它脊椎動物）自己能由簡單的前體合成的，不需要由飲食供給的氨基酸，例如甘氨酸、丙氨酸等氨基酸。

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分子中同時含有氨基和羧基的有機化合物，是組成蛋白質(zhì)的基本單位。

氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)品如何判斷是哪一種氨基酸？

你好，氨基酸混合樣品，通常是氨基酸溶于0.1 mol/L的HCl水溶液，如果你僅僅買了混標(biāo)，你有下列選擇：1 買一根氨基酸分析專用柱，按色譜柱廠家提供的方法(柱前衍生化方法+液相分析方法)分析，然后和色譜柱廠家的譜圖對比找峰；2 買一臺氨基酸分析以，按儀器廠家提供的方法(一般是離子交換柱分離+柱后衍生)測試，與儀器廠家的譜圖對比找峰。

什么是氨基酸的離子交換

離子交換層析 (ion exchange chromatography，簡稱ICE)是分析和制備樣品混合物的液-固相層析方法，是基于待測物質(zhì)的陽離子或陰離子和相對應(yīng)的離子交換劑間的靜電結(jié)合，即根據(jù)物質(zhì)的酸堿性、極性等差異，通過離子間的吸附和脫吸附原理將電解質(zhì)溶液各組分分開。它是從復(fù)雜混合物體系中分離性質(zhì)極為相似的生物分子的有效手段之一。由于帶電荷不同的各種物質(zhì)對離子交換劑有不同親和力，通過改變洗脫液的離子強度和pH值，控制這種親和力，即可使這些物質(zhì)依據(jù)親和力大小順序依次從層析柱中洗脫下來。

氨基酸是兩性電解質(zhì)，分子 上的凈電荷取決于氨基酸的等電點和溶液的pH值，各種氨基酸分子結(jié)構(gòu)不同，在同一pH值時所帶電荷的性質(zhì)(正、負(fù))和多少不同，與離子交換樹脂的親和力有差異，因此可根據(jù)親和力從小到大的順序被洗脫液分別洗脫下來，達(dá)到分離的效果。

三、儀器與試劑

(一)實驗器材

(1)玻璃層析柱

(2)試管

(3)移液管

(4)恒壓洗脫瓶

(5)部分收集器

(6)水浴鍋

(7)分光光度計

(8)電爐

(二)材料與試劑

(1)苯乙烯磺酸鈉型樹脂(100~200目)

(2)2mol/L鹽酸溶液

(3)2mol/L氫氧化鈉溶液

(4)標(biāo)準(zhǔn)氨基酸溶液：將天門冬氨酸和賴氨酸分別配成2mg/mL的0.1mol/L鹽酸溶液。

(5)混合氨基酸溶液：將上述天門冬氨酸和賴氨酸溶液按1：4比例混合。

(6)檸檬酸-氫氧化鈉-鹽酸溶液(pH5.8，鈉離子濃度0.45mol/L)：取檸檬酸14.25克、氫氧化鈉9.30克分別溶于水后混合，加入濃鹽酸5.25毫升，定容至500毫升;4℃冰箱保存。

(7)顯色劑：2克水合茚三酮溶于95%乙醇中，加水至100毫升。